挖外泌体机制研究的关注点

外泌体结构示意图

引用Umibio公开学术交流讲座

谁产生的外泌体，谁接受的外泌体，这个问题一定需要回答清楚。如果只有产生外泌体的细胞，而没有接受外泌体的细胞，这个研究是无法形成闭环的。

4.4 外泌体作用后受体细胞会发生什么功能变化？

外泌体进入受体细胞后，是怎么释放出来的，释放出来的哪些核心物质发挥了作用，从而导致受体细胞的功能发生了什么变化。

4.5 受体细胞功能变化的作用机制是什么？

功能变化是什么作用机制，寻找它的机制通路，把因果关系都讲清楚，把这个故事讲得完整。我们在开始自己的研究或者去看文献时，带着这5个问题，都会对我们有帮助。下面我们分享一篇高分文章：牙源干细胞分泌的外泌体治疗创伤性脑损伤的机制研究。

2022年西安交通大学裴丹丹、李昂老师团队在International Journal
of Oral Science（IF=24.897）上发表题为“Dental stem cell-derived extracellular
vesicles transfer miR-330-5p to treat traumatic brain injury by regulating
microglia polarization”的文章。该研究团队通过对激活的小胶质细胞以及干细胞分泌的外泌体共培养的小胶质细胞分别进行miRNA-seq和Q-PCR验证等检测，揭示了由SHED衍生的EVs（SHED-EVs）转移的miR-330-5p在调节小胶质细胞（中枢神经系统的关键免疫调节器）方面的关键功能，阐明了人类脱落乳牙（SHED）的干细胞分泌的细胞外囊泡（EVs）作为创伤性脑损伤功能恢复的潜在治疗策略的作用机制。

结果：在研究团队以前的研究中发现，SHED-EVs通过转移小胶质细胞M1/M2的极化，促进了大鼠TBI的功能恢复。为了阐明SHED-EV调控的分子机制，在EV定性后进行了miRNA-seq。发现在SHED-EVs共同培养的活化小胶质细胞中，有27个上调的miRNAs和39个下调的miRNAs。其中miR-330-5p在SHED-EV共培养的小胶质细胞中有4倍增长，所以miR-330-5p被选为潜在的效应物，SHED-EVs将miR-330-5p转移到激活的小胶质细胞上。为了澄清内源性和外源性miR-330- 5p在调节小胶质细胞中的关键作用，该研究中用抑制剂抑制了小胶质细胞中的miR-330-5p，并用SHED-EVs恢复了miR-330-5p的表达。为了探索miR-330-5p调控小胶质细胞极化的机制，研究者通过三个数据库（Targetscan、microRNA.ORG和miRDB）预测了潜在的目标，通过验证，发现Ehmt2是miR-330-5p的下游目标基因。

随后又验证了Ehmt2的下游作用机制。同时在大鼠中构建了TBI模型，结果发现SHED-EVs/miR-330-5p通过调节小胶质细胞的极化来改善大鼠的TBI。

结论：SHED-EVs/miR-330-5p通过靶向Ehmt2-H3K9me2介导的CXCL14转录来改变小胶质细胞的极化，导致神经炎症的缓解和脑损伤的修复增强；该研究拓展了牙源性干细胞外泌体的应用范围，同时还为TBI等神经疾病的治疗提供了新的策略及靶点。