驯鹿发表文献:全人BCMA靶向CAR (CT103A) T细胞免疫疗法长期可持续性的模型解释

间充质干细胞、免疫细胞、外泌体源头实验室

摘要

为了弄清楚CT103A的药代动力学特征并研究其长期持续存在的潜在原因,我们应用非线性混合效应模型建立了基于18个患者队列的CT103A的群体药代动力学(PopPK)模型,并分析了CAR T细胞克隆进化。结果表明,发现髓外扩散会损害Cmax,因此将其作为协变量添加到修改后的模型中。该模型显示托珠单抗和皮质类固醇对CT103A扩增率没有影响。通过CAR整合位点分析,外周 CT103A持续升高的患者中不存在显性克隆。最后,具有较低收缩率常数和较高Cmax以及记忆CT103A分数的患者可以获得更好的临床反应。

综上所述,本研究开发了一种全人抗BCMA CAR T细胞疗法的PopPK模型,并总结了其模型特征。我们认为CT103A的长期持续存在归因于记忆CAR T细胞部分,而不是克隆进化。这项研究将提高人们对CAR T细胞免疫疗法的药代动力学和PopPK的认识。

介绍

药代动力学是药理学的一个分支,专门用于描述给予患者的药物的命运,包括药物吸收、分布、代谢和排泄的程度和速率(Whiting等,1986)。由于个体的药代动力学可能随时间而变化,而且个体内药代动力学参数的大多数变异性是不可预测的,因此在人群水平上研究药代动力学非常重要(Currie,2018年)。作为源自患者自身血液的“活药”,CAR T细胞不遵循经典药物的典型药代动力学模型(Grupp 等,2013;Stein 等,2019)。因此,对CAR T细胞的药代动力学研究可以提高我们对其功效、安全性和最佳剂量的理解。

我们之前报道了一项针对18名复发/难治性多发性骨髓瘤患者的新型全人BCMA靶向CAR(CT103A) 的I期研究(http://www.chictr.org.cn, Number, ChiCTR1800018137)。CT103A转基因持续时间中位数为307.5天。在1年时,只有一名患者的抗药物抗体(ADA)呈阳性。在这项研究中,我们还旨在找出CT103A长期持续存在的潜在原因。

我们基于该患者队列(n=18)建立了CT103A的PopPK模型,分析了影响参数的协变量并评估了最佳剂量。此外,还计算了治疗细胞因子释放综合征(CRS)的疗法(托珠单抗和皮质类固醇)对CAR-T 扩增率的影响。最后,由于一些患者表现出持久的高外周CT103A,我们监测了CAR整合位点以揭示克隆群体结构。我们的研究结果表明,CT103A的长期持续存在可能不是由于克隆进化,而是由于记忆CAR T细胞分数。这项研究将提高人们对CAR T细胞免疫疗法的药代动力学和PopPK的认识。

结果

患者特征

纳入患者的基线特征列于表1。他们的中位年龄为53.5岁(范围为38-66岁),其中 38.9%的年龄≥60岁。10名患者为男性,8名患者为女性。5名患者患有髓外多发性骨髓瘤 (EMM) (27.8%)。

EMM 的定义是由于血行扩散导致的骨外位置存在软组织肿块,这些肿块与受累骨骼不相邻。6名患者(33.3%)曾接受过自体HSCT,而4名患者(22.2%)曾接受过鼠类抗BCMA CAR T细胞治疗(http://www.chictr.org.cn, Number, ChiCTR-OPC- 16009113)。CT103A以1、3和6×106 CAR阳性T细胞/kg 给药。总共18名 (94.4%) 患者中有17名(94.4%)出现CRS,其中1名(12/17, 70.6%)为1级和2.4级 (4/17, 23.5%) 和1名(1/17, 5.9%) 患者分别经历了3级和 4级CRS。11名患者(61.1%)接受了托珠单抗治疗,12名患者(66.7%)接受了皮质类固醇治疗以治疗CRS。

表 1 基线时的患者和疾病特征。

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CT103A的PopPK基础模型

在本研究中,CT103A的细胞动力学通过液滴数字PCR(ddPCR)的转基因测量和流式细胞术在淋巴细胞中表达CAR受体的CD3+细胞的百分比确定(Lou等,2020)。由于流式细胞术和基于 ddPCR的测量之间存在显着的线性相关性(p

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图 1. 基于模型的 CT103A 药代动力学分析。(A)CT103A 临床研究中外周转基因的1年临床反应的药代动力学(B)与观测数据相比,基本模型(左)和修改模型(右)模拟的视觉预测检查。空心圆圈代表观察值,实线和虚线分别代表观察的中位数和 95% CI。中间的红色阴影区域代表1000次模拟结果的中位数的90%置信区间,蓝色阴影区域代表 1000 次模拟结果的第 2.5和97.5个百分位数的90%置信区间。(C) 髓外扩散和先前疗法(先前的其他CAR T细胞疗法和自动 HSCT)对贝叶斯事后随机效应估计的影响。EMM,髓外多发性骨髓瘤(D)髓外扩散和先前疗法(先前的其他CAR T细胞疗法和自动 HSCT)对 AUC0-28 的影响。(E)CT103A转基因拷贝数随时间变化的个体拟合图。(F)绘制输注后第14天和第90天反应与剂量的概率。将第14天的概率拟合到逻辑回归,并显示标准误差条。蓝色空心圆圈代表观测数据;红线代表估计数据。(G) 使用/不使用类固醇(左)和使用/不使用托珠单抗(右)的一年临床反应。

CT103A PopPK结构基础模型改编自tisagenlecleucel模型,并通过应用非线性混合效应模型(NONMEM)开发而成。输注后,CT103A 的拷贝数在最初几天下降,然后以速率ρ呈指数增长。在时间Tmax达到最大浓度Cmax后,CT103A膨胀动力学随后是双指数收缩,包括初始快速收缩(恒定速率α)和随后的持续收缩(恒定速率 β)。最初的收缩发生得很快,被认为对应于有效CAR-T细胞群的快速下降。CT103A下降的第二阶段随着时间的推移逐渐发生,这被认为是由记忆CAR T细胞群的持续存在引起的。Fb是CT103A在峰值扩张(Tmax)时收缩率为β的分数。CT103A PopPK 基础模型的公式在方程式1中给出如下:

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使用预测校正的视觉预测检查(pcVPC)和个人拟合(图1B左面板和图 1C)评估模型评估。补充材料中包含其他诊断。计算了主要参数即 Cmax、Tmax、foldx、fb、α和β的固定效应和随机效应,并在补充表S1中列出。初始倍增时间(ln 2/ρ)和初始(ln 2/α)和终末(ln 2/β)下降的半衰期分别为1.78、6.04和149.39天。

 

协变量评估和模型修改

为了探索外在和内在因素对 CT103A PopPK 基础模型的影响,我们随后对患者人口统计数据(年龄、性别和体重)、先前治疗(先前的鼠抗BCMA CAR T细胞治疗(http://www.chictr.org.cn, Number, ChiCTR-OPC-16009113) 和自体造血干细胞移植 (auto-HSCT)), 髓外扩散 (Bhutani et al., 2020; Sevcikova et al., 2019), 剂量和CRS 等级(图 1D;补充图 S3;补充表 S2)。结果表明,在这些外在和内在因素中,只有髓外扩散对 Cmax 有显着影响。髓外骨髓瘤患者的Cmax显着低于没有髓外扩散的患者 (p=0.0258)。这一结果与我们之前报道的同一患者队列的 Kaplan-Meier 分析一致,这表明髓外扩散与PFS缩短相关(p = 0.015)(Wang 等人,2021)。

此外,我们还探讨了输注后前 28天所有因素对曲线下面积的影响 (AUC0-28)。我们的结果表明,先前进行过自动 HSCT 或髓外扩散的患者的 AUC0-28 显着降低(分别为 p = 0.0357 和 0.0372)(图 1E)。在将髓外扩散作为协变量包括在内后,构建了一个修改模型(表 2),并显示了其诊断结果(图 1B右面板和图 2)。修改后的模型公式如方程式2所示:

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表 2. 修改后的模型 PK 参数。

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图 2. 修改后的 m41ode 的诊断。(A)个人预测浓度与观察浓度(左)。人群预测浓度与观察浓度(右)。红线代表回归线。(B)条件加权残差与时间 (左) 和总体预测浓度(右)。红线和蓝色虚线分别代表条件加权残差等于0和±4 的位置。

剂量优化

为了帮助优化给药策略,我们构建了剂量反应曲线的逻辑回归模型(图 1F)。在第14天没有发现更高剂量的反应概率增加(p=0.487)。此外,所有剂量在第90天的反应概率为100%。此外,如先前报道的,在 6×106 CAR T细胞/kg 剂量组中≥3级CRS的发生率显着高于其他两个剂量组。因此,出于效率和安全原因,1×106 CAR T 细胞/kg是CT103A的推荐剂量。值得注意的是,这些剂量优化结果仅对这种用于BCMA的全人类CAR T细胞有效。

 

托珠单抗/皮质类固醇对CT103A扩增和长期疗效的影响

托珠单抗和皮质类固醇经常用于治疗CRS,这是CAR T细胞治疗的一种靶向副作用。然而,托珠单抗或皮质类固醇是否会影响CAR T细胞的扩增存在争议。此外,从未报道过托珠单抗和皮质类固醇对多发性骨髓瘤患者靶向BCMA CAR T细胞扩增的影响。

在这项研究中,12名患者静脉注射地塞米松(10 mg/dose,范围 5∼20 mg/dose)或甲基强的松龙(40 mg/dose,范围 10∼200 mg/dose)用于CRS管理。中位累积地塞米松等效剂量为 40 mg(范围 10 ∼ 198.75 mg),中位皮质类固醇治疗持续时间为3天(范围 1∼18 天)。此外,11名患者以8mg/kg体重(本研究中最大剂量为720mg)静脉内接受托珠单抗治疗 CRS。

在这里,我们基于PopPK模型(方程 3)确定了这两种药物对 CT103A 膨胀率 ρ 的影响。T1和T2分别定义为托珠单抗和皮质类固醇的首次给药时间。F1和 F2定义为托珠单抗和皮质类固醇对扩张率的影响,并使用 NONMEM 计算为0.966 和 0.944,两者均接近 1(补充表 S3)。因此,托珠单抗和皮质类固醇均未发现影响 CT103A 扩增速率。此外,长期疗效不受托珠单抗或皮质类固醇给药的影响(图 1G)。激素组和非激素组的缓解率分别为91.67%(11/12)和50%(3/6),而托珠单抗分别为81.82%(9/11)和71.43%(5/7)组和非托珠单抗组。

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克隆多样性和效应器/记忆分数分析

由于四名患者(患者001、007、009和010)表现出持久的高水平外周CT103A(输注后至少9个月内高于2,000 拷贝/μg gDNA),我们通过分析CAR整合位点来监测克隆起源,这在补充方法中有所描述。值得注意的是,所有这些受试者的克隆多样性在输注后均未出现明显下降(图 3A、B)。这一发现表明这些患者的 CT103A中不存在显性克隆。此外,我们分析了这四名患者的CAR-T人群的成分。他们的CAR T细胞群分为效应CAR T细胞(红线),具有快速激活和提取,以及记忆CAR T细胞(蓝线),并且具有缓慢扩张和持久性(图 3C)。所有这四名患者在Tmax后都显示出高比例的记忆CAR T细胞。

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图 3. 长期高水平外周 CT103A 患者的克隆多样性和效应/记忆分数分析。(A) 输注后至少 9 个月持续高 CT103A 转基因拷贝数 (>2000 拷贝/μg DNA) 的患者的克隆整合位点分布分析。青色表示收集低丰度(

 

最后,我们比较了具有不同1年临床反应的患者的PopPK模型常数。PD组初始和持续收缩常数(α和β)的平均值均高于CR/PR组,表明PD组CT103A下降更快。此外,PD组的fb和 Cmax 平均值低于CR/PR组。然而,这些差异均无统计学意义,这可能是由于PD患者人数较少(n=4)。
总之,通过使用 NONMEM,我们基于来自I期临床研究的18名患者建立了全人抗 BCMA CAR T 细胞疗法(CT103A)的PopPK模型。发现髓外扩散会损害Cmax,因此将其作为协变量添加到最终模型中。由于较高的剂量与较高的严重CRS发生率显着相关,但与 CT103A的反应概率无关,因此建议使用较低的剂量(1×106 CAR T细胞/kg)。托珠单抗和皮质类固醇对CT103A扩增率或1年临床反应没有影响。外周CT103A持续高位患者不存在显性克隆。最后,具有较低收缩率常数和较高Cmax 以及记忆CT103A分数的患者可以获得更好的临床反应。

讨论

由于CAR T细胞疗法极大地改变了淋巴恶性肿瘤的治疗格局,因此对该领域的药代动力学研究有更大的需求。到目前为止,很少有研究关注CAR T细胞治疗的PopPK。只有一种抗CD19 CAR T,tisagenlecleucel,已经通过数学建模进行了分析。

在这项研究中,我们开发了基于18名患者的PopPK模型。尽管患者队列很小,但对CT103A转基因数量进行了密集测试,基于此数据开发的PopPK模型得到了很好的诊断。

在这里,我们开发了最近发表的新型全人类BCMA靶向CAR(CT103A)的PopPK模型。然而,PopPK模型和剂量优化仅对这种用于BCMA的CAR-T细胞有效。在之前的研究中,CT103A的总体缓解率(ORR)为100%,72.2%的患者达到完全缓解或严格完全缓解(sCR)。在1年时,77.8%的患者可检测到CAR转基因。中位CAR转基因持续时间为 307.5 天。只有一名患者的抗药抗体呈阳性。长持久性和低免疫原性的良好表现可能部分归功于CT103A中构建的全人BCMA抗体。CT103A的这种长期可持续性可能是由于完全由人类组成,没有不同物种诱导的免疫原性。对于使用其他一些抗 BCMA CAR产品治疗的患者,在输注后6个月内,CAR转基因浓度大多低于外周血中的定量水平。另一方面,高记忆CAR T细胞部分发挥了重要作用。

在之前报道的 tisagenlecleucel 模型中(Stein et al., 2019),没有协变量对 tisagenlecleucel 扩增的细胞动力学参数有统计学意义的影响,因此 tisagenlecleucel 的最终细胞动力学模型与基础模型相同。然而,与 tisagenlecleucel 模型不同,髓外扩散在统计学上显着影响 Cmax,并已作为协变量添加到最终模型中。参数θextramedulary (extramedulary=yes) 用于修改基础模型。先前的研究报道,髓外多发性骨髓瘤与高风险特征相关,例如高 LDH 水平、高风险细胞遗传学或高风险基。

托珠单抗和皮质类固醇对CAR T细胞扩增的影响存在争议。Marco L. Davila 等人报道,给予淋巴毒性大剂量类固醇治疗CRS会导致抗 CD19 CAR-T 细胞快速消融(Shank 等人,2017 年)。另一方面,其他一些研究报告称,与非类固醇组相比,类固醇组具有更大的暴露量和更长的CAR-T细胞功能持续时间中位数。此外,一项基于PopPK模型的研究表明,托珠单抗和皮质类固醇对tisagenlecleucel的扩增率没有影响。在本研究中,我们的结果表明托珠单抗和皮质类固醇对 CT103A 的扩增率和长期疗效均无影响。

总之,本研究在18名复发/难治性多发性骨髓瘤患者中开发了一种新型全人 BCMA 靶向 CAR (CT103A) 的PopPK模型。计算模型常数。发现髓外扩散会损害 Cmax,因此将其作为协变量添加到修改后的模型中。表明治疗CRS的疗法(托珠单抗和皮质类固醇)的效果对CT103A扩增率没有影响。我们认为CT103A的长期持续存在归因于记忆CAR T细胞部分,而不是克隆进化。我们的研究将提高人们对CAR T细胞免疫疗法的药代动力学和PopPK的理解。

 

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具体方法详见:A Model Perspective Explanation of the Long-Term Sustainability of a Fully Human BCMA-Targeting CAR (CT103A) T-Cell Immunotherapy

doi:10.3389/fphar.2022.803693

 

 

编辑:小果果,转载请注明出处:https://www.cells88.com/cells/myxb/10989.html

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上一篇 2022-03-18 10:25
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